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　 基因組學(xué)已經(jīng)深刻地改變了生命科學(xué)的諸多領(lǐng)域的面貌。目前它的主要內(nèi)容是新的全基因組堿基序列的測(cè)定和在全基因組范圍內(nèi)鑒定那些在不同水平上影響生命活動(dòng)的基因群的功能和相互作用。為達(dá)此要求,近年出現(xiàn)的第二代測(cè)序(深度測(cè)序)技術(shù)和基因芯片技術(shù)發(fā)揮了關(guān)鍵作用,但是兩者都需要足夠的高質(zhì)量的核酸樣品。所以,在只有或只能用單細(xì)胞或極少量細(xì)胞的情況下,如果沒有特殊手段,上述分析往往不能常規(guī)、方便地進(jìn)行。單細(xì)胞基因組擴(kuò)增試劑盒能夠?qū)崿F(xiàn)高度均一的全基因組擴(kuò)增，這種方法是基于多次退火環(huán)狀循環(huán)擴(kuò)增(MALBAC)技術(shù)，該技術(shù)首先利用獨(dú)特的具有鏈置換活性的DNA聚合酶進(jìn)行準(zhǔn)線性的全基因組預(yù)擴(kuò)增，隨后通過PCR進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增，為下游分析提供充分的實(shí)驗(yàn)材料。那么細(xì)胞基因組常見問題有哪些?

　　常見問題

　　1.選擇的實(shí)驗(yàn)材料要新鮮，處理時(shí)間不易過長(zhǎng)。

　　2.在加入細(xì)胞裂解緩沖液前，細(xì)胞必須均勻分散，以減少DNA團(tuán)塊形成。

　　3. 提取的DNA不易溶解：不純，含雜質(zhì)較多;加溶解液太少使?jié)舛冗^大。沉淀物太干燥，也將使溶解變得很困難。

　　4. 電泳檢測(cè)時(shí)DNA成涂布狀：操作不慎;污染核酸酶等。

　　5.分光光度分析DNA的A280/A260小于1.8;不純，含有蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。在這種情況下，應(yīng)加入SDS至終濃度為0.5%，并重復(fù)步驟2～8。

　　6.酚/氯仿/異戊醇抽提后，其上清液太黏不易吸?。汉邼舛鹊腄NA，可加大抽提前緩沖液的量或減少所取組織的量。

　　國(guó)產(chǎn)品牌普朗醫(yī)療生產(chǎn)的全基因組擴(kuò)增(Whole Genome Amplification)是一種對(duì)全部基因組序列進(jìn)行非選擇性擴(kuò)增的技術(shù)，其目的是在沒有序列傾向性的前提下大幅度增加DNA的總量。 采用MDA(多重鏈置換擴(kuò)增)的方法，能夠在16個(gè)小時(shí)之內(nèi)，將ng甚至是pg級(jí)的微量DNA有效擴(kuò)增至10-40μg高覆蓋度的全基因組DNA。

                           （普朗醫(yī)療品牌----全基因組擴(kuò)增試劑盒）

　　產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

　　高產(chǎn)量：ng級(jí)微量樣本經(jīng)擴(kuò)增后可獲得10-20μg的DNA產(chǎn)物(普通型);

　　pg級(jí)微量樣本經(jīng)擴(kuò)增后可獲得30-40μg的DNA產(chǎn)物(高效型);

　　高覆蓋度：微量基因組樣本擴(kuò)增后可達(dá)95%以上的覆蓋度;

　　操作簡(jiǎn)單：?jiǎn)喂懿僮鳌?步完成、無需純化、操作時(shí)間短;

　　高保真度：所用的DNA Polymerase具有較高的保真性;

　　高均一度：基于無偏好性的MDA的擴(kuò)增，可實(shí)現(xiàn)全基因組的均一擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物平均片段長(zhǎng)度大于20kb;

　　設(shè)備要求低：只需無熱蓋的PCR儀或者水浴鍋就可完成整個(gè)反應(yīng)。

　　下游應(yīng)用：

　　經(jīng)本試劑盒擴(kuò)增后的DNA產(chǎn)物可用于多種下游分析平臺(tái)

　　· 基因突變檢測(cè)

　　· SNP基因分型

　　· CNV全景圖和非整倍體檢測(cè)

　　· 全基因組和外顯子測(cè)序

　　· 實(shí)時(shí)定量PCR

　　· 分子克隆

　　· 陣列比較基因組雜交

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