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除了磁珠法提取核酸,現(xiàn)在的核酸提取還用到什么方法
除了磁珠法提取核酸,現(xiàn)在的核酸提取還用到什么方法
加入時(shí)間:2021-01-14 14:16:14 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:2368
核酸檢測(cè)流程主要包括標(biāo)本采樣、核酸提取、PCR檢測(cè)等步驟,在新冠疫情的檢測(cè)中,通過采集被檢測(cè)人員的鼻咽拭子,然后將樣本送去核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室,進(jìn)行樣本核酸提取和檢測(cè),其中核酸提取則是連接初始采樣與PCR檢測(cè)的關(guān)鍵步驟,值得重視,那么,核酸提取的方法有哪些呢? 早期的核酸提取方法包括酚抽提法、堿裂解法、CTAB抽提法、煮沸法等。但是由于使用了苯酚、氯仿等有毒揮發(fā)性試劑、核酸的回收率較低,損失量大、操作步驟復(fù)雜等缺點(diǎn)已經(jīng)被。 新技術(shù)取代,核酸提取目前主要采用的方法有磁珠法和一步法。下面就給大家具體介紹一下這兩種核酸提取方法。
磁珠法提取核酸的原理是核酸與磁珠結(jié)合,主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用。細(xì)胞或組織在裂解液作用下,其中的核酸DNA/RNA被釋放出來,此時(shí)經(jīng)過表面修飾的納米磁珠即與核酸進(jìn)行特異性結(jié)合,形成“核酸-磁珠復(fù)合物”。然后在外加磁場(chǎng)的作用下將復(fù)合物分離,經(jīng)過洗脫非特異性吸附的雜質(zhì)、去鹽、純化后,得到欲提取的核酸。 另外一種常用的核酸提取方法是一步法,該方法在新冠核酸檢測(cè)中也發(fā)揮了快速有效的作用。該方法使用核酸釋放劑或裂解液使樣本中的待測(cè)物從與其他物質(zhì)結(jié)合的狀態(tài)中釋放出來,以便于使用體外診斷試劑或儀器對(duì)待測(cè)物進(jìn)行檢測(cè)。其提取核酸具有簡便的優(yōu)勢(shì),整個(gè)操作在一個(gè)反應(yīng)管進(jìn)行,減少操作誤差,提高檢驗(yàn)結(jié)果可重復(fù)性。獨(dú)特的干擾物封閉機(jī)制,分離雜質(zhì),純化核酸,避免干擾。適用于設(shè)備和專業(yè)人員缺少的地區(qū)。 隨著冬季的來臨,核酸檢測(cè)需求越來越多。臨床對(duì)分子診斷、核酸檢測(cè)的高通量、自動(dòng)化要求的不斷增加,傳統(tǒng)核酸提取純化方法操作復(fù)雜、提取效率低、不易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化,已不能滿足臨床診斷需求。新型的高科技分離材料和技術(shù)被引入,簡便、安全、高效、低成本且適于自動(dòng)化的核酸分離與醫(yī)療設(shè)備,將更好的受到臨床的歡迎,更多地應(yīng)用到各個(gè)領(lǐng)域。 |