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使用自動核酸提取儀時要注意什么,如何降低操作誤差?
使用自動核酸提取儀時要注意什么,如何降低操作誤差?
加入時間:2021-08-05 16:25:24 當(dāng)前新聞點擊率:1072
在本次新冠疫情中,多個高風(fēng)險區(qū)采取全城檢測的策略。在巨大規(guī)模樣本處理要求下,自動化的核酸提取儀在加速新冠病毒檢測中起了重要的作用。 核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸提取工作的儀器。廣泛應(yīng)用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業(yè)和分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域。那么,在使用自動核酸提取儀時要注意什么呢? 1、試劑使用前確認(rèn)是否結(jié)晶 提取試劑(尤其是裂解液或者裂解板)在溫度過低時可能會有結(jié)晶出現(xiàn),結(jié)晶會降低裂解液的裂解效果,可以在水浴鍋中放置片刻使結(jié)晶完全溶解。 2、試劑預(yù)裝板撕膜注意事項 預(yù)裝板使用前盡量用甩板機瞬時離心或手動甩板,消除封膜和側(cè)壁上的液體,以確保提取過程中的裂解、洗滌和洗脫的效果。撕膜后注意板口是否有殘余的貼膜,如果有,盡量除去,否則在提取過程中磁套會刮擦液體,有交叉污染的風(fēng)險。
3、加樣體積不超過試劑說明書規(guī)定 大多數(shù)提取試劑的上樣體積都是在200μL左右,不建議私自增加,樣品量過多會帶來2個后果:一是導(dǎo)致裂解液稀釋,裂解效果下降,二是在提取過程中有液體溢出孔板,交叉污染的風(fēng)險。 4、確保蛋白酶K加到試劑中 某些提取試劑需要在裂解板中額外添加蛋白酶K,由于蛋白酶K的加樣體積一般只有5-20ul,盡量確保不要加到孔壁上,否則也會造成混合不均勻而降低裂解效果。 5、注意正確的放板順序 上機放板子順序嚴(yán)格按照儀器或說明書提示,保證兩人檢查,A1孔位置注意有沒有方向弄錯,特別是加樣品的裂解板和洗脫板,一旦放反,所有樣本順序錯亂。 核酸提取儀基于由磁棒架上的磁棒吸附磁珠,將磁珠移至不同的試劑槽內(nèi)。它可以應(yīng)用各類樣品的核酸的提取,可同時處理多個樣本,整個純化過程只需要轉(zhuǎn)移磁株,不需要分液或吸液,有效避免交叉污染以及粘稠樣品的堵塞等問題,力求簡化繁復(fù)的提取流程,滿足大批量樣本的核酸提取需求。 |