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普朗醫(yī)療-Ampc酶檢測方法介紹
普朗醫(yī)療-Ampc酶檢測方法介紹
加入時間:2011-12-15 16:31:07 當(dāng)前新聞點擊率:5037
普朗醫(yī)療器械公司資訊-- 1.初篩: (1)頭孢西?。?0μg/片)與頭孢西?。?0μg)/鄰氯西林(200μg)。后者比前者的抑菌圈≥5mm即疑為Ampc。 (2)5種紙片篩選:馬斯平、泰能、頭孢西汀、頭孢他啶與頭孢他啶/克拉維酸。如頭孢西汀≤18mm,對馬斯平、泰能敏感即疑為產(chǎn)Ampc,如頭孢他啶與其酶抑制劑的抑菌圈≥5mm可能產(chǎn)ESBLS。 2.確認(rèn)試驗(頭孢西汀三維水相試驗法) 3.三維水相試驗方法的改進 (1)將標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 25922按常規(guī)藥敏紙片K-B法操作均勻涂布于M-H平板上。 (2)在M-H平板中心貼一片頭孢西汀(30ug/片) 紙片,在距紙片邊緣1cm處,用無菌手術(shù)刀片切3cm長度的小槽,將待測菌株的6個菌落接種于槽內(nèi)(勿溢出槽外),35℃孵育18-24h。 (3)結(jié)果觀察:若抑菌圈向內(nèi)凹陷,即AmpC酶陽性。 ※三維水相試驗方法的改進(M-H平板打孔[2mm]擴散法). 4.質(zhì)粒型AmpC酶三聯(lián)紙片方法的檢測 (1)將標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 25922按常規(guī)藥敏紙片K-B法操作均勻涂布于M-H平板上。 (2)在M-H平板中心貼一片頭孢西汀(30ug/片) 紙片,在紙片邊緣貼有待測菌的紙片(紙片上含20ul, PH8.0,1M Tris-0.1MEDTA)。 (3)另一側(cè)邊緣貼有產(chǎn)AmpC酶菌的紙片(同上)。 (4)35℃孵育18-24h,如待檢菌出現(xiàn)扁平或凹陷的抑菌環(huán)為陽性。 |