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紅細(xì)胞沉降率在全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀研究中的應(yīng)用
加入時(shí)間:2012-01-11 10:40:32  當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:11561

    普朗醫(yī)療器械公司資訊 紅細(xì)胞沉降率(下稱血沉)是指紅細(xì)胞(RBC)在一定條件下沉降的距離(mm/h),是一種被廣泛應(yīng)用的傳統(tǒng)檢驗(yàn)項(xiàng)目。隨著全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀的不斷出現(xiàn),手工法逐漸被自動(dòng)化方法所取代。目前,全自動(dòng)五分類血液細(xì)胞分析儀檢測(cè)的方法較多,給結(jié)果的可比性造成一定難度。本文就血沉測(cè)定的有關(guān)問題綜述如下。

    1.抗凝劑的使用
    幾乎所有的血沉測(cè)定方法都要使用抗凝劑。國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(ICSH)推薦的魏氏法(Westergren) ,使用109mmol/L的枸櫞酸鈉作為抗凝劑。其他還有使用肝素、EDTA-K3、EDTA-K2 、EDTA-Na2作抗凝劑的報(bào)道。有作者認(rèn)為因使用肝素抗凝和使用枸櫞酸鈉抗凝不同,所測(cè)結(jié)果差異顯著,肝素抗凝使血沉明顯增快,原因是使用的抗凝劑不同以及抗凝劑和血液的比例不同,其兩種抗凝劑所測(cè)血沉結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)一步全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀研究認(rèn)為,使用枸櫞酸鈉抗凝所測(cè)血沉能夠反映血沉真實(shí)結(jié)果。一般認(rèn)為枸櫞酸鈉抗凝和使用EDTA 抗凝測(cè)血沉,結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而只有方法學(xué)的差異,故ICSH 和美國國家實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS) 也推薦改良魏氏法,使用EDTA 抗凝測(cè)血沉。但EDTA-K3引起細(xì)胞內(nèi)水向細(xì)胞外轉(zhuǎn)移, 細(xì)胞皺縮效應(yīng)明顯高于EDTA-K2和EDTA-Na2,除可造成紅細(xì)胞比容( Hct) 的差異外,也可能造成血沉測(cè)定結(jié)果的差異。

    2.魏氏法與自動(dòng)測(cè)定法
    血沉的測(cè)定在臨床醫(yī)學(xué)的應(yīng)用已有悠久的歷史,1921年Westergren和Fehrams等在Hewson研究的基礎(chǔ)上首次創(chuàng)立了以沉降距離報(bào)道血沉結(jié)果的魏氏法。至今血沉測(cè)定方法主要有魏氏法、斜管法、快速法、微量法和血沉儀自動(dòng)測(cè)定法等。但I(xiàn)CSH在1993年發(fā)表的血沉測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化方法就只有魏氏法,衛(wèi)生部醫(yī)政司在《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中也推薦魏氏法作為實(shí)驗(yàn)室血沉測(cè)定的方法之一。近年來全自動(dòng)五分類血液細(xì)胞分析儀自動(dòng)測(cè)定法在國內(nèi)有廣范的應(yīng)用,幾乎所有不同檔次的血沉自動(dòng)測(cè)定分析儀都是使用可控制和可移動(dòng)的紅外發(fā)射接收裝置對(duì)血沉現(xiàn)象進(jìn)行跟蹤觀察,得到的一系列數(shù)據(jù)經(jīng)單片機(jī)處理成為臨床可用的各種參數(shù)。自動(dòng)測(cè)定法和其他方法比較最大優(yōu)點(diǎn)是動(dòng)態(tài)反映血沉的全過程。較先進(jìn)的儀器除報(bào)告1、2 h 的血沉結(jié)果和Ka Tz 指數(shù)外,還可選擇根據(jù)血沉高度(H)與時(shí)間(T)來報(bào)告動(dòng)態(tài)血沉結(jié)果(H-T曲線) 以及紅細(xì)胞最大沉降速度終末時(shí)間(Tm)、紅細(xì)胞最大沉降速度(Vm)等有意義的指標(biāo)。

    3.質(zhì)量控制和影響因素
    雖然血沉比任何其他血常規(guī)試驗(yàn)穩(wěn)定,但由于紅細(xì)胞沉降反應(yīng)的測(cè)定僅限于用新鮮血液,參考物與質(zhì)控物無法獲取,給血沉質(zhì)量控制帶來難度。國內(nèi)有人建立了使用新鮮全血完成質(zhì)量控制的方法:采取計(jì)算日積累平均值,制作Levey Jennings 質(zhì)量控制圖,參考Levey Jennings 質(zhì)量控制規(guī)則對(duì)血沉進(jìn)行質(zhì)量控制。這個(gè)方法容易在實(shí)驗(yàn)室中實(shí)行,是值得推廣的質(zhì)量控制方法。血液的濃度對(duì)血沉結(jié)果的影響各家報(bào)道不一。有人認(rèn)為抗凝劑比例高,血量少,血沉減慢;有人認(rèn)為正相反,抗凝劑比例高,血量少,血沉加快。一般認(rèn)為血沉在單位時(shí)間內(nèi)的下降距離是多種因素相互作用的結(jié)果,有血漿因素、技術(shù)因素、紅細(xì)胞因素。當(dāng)某個(gè)因素發(fā)生改變,結(jié)果會(huì)受到影響。所以血沉仍要以魏氏法作為參考方法。血沉與Hct的關(guān)系得到多數(shù)人的認(rèn)可,現(xiàn)普遍使用血沉方程K 值來表達(dá)血沉和Hct的關(guān)系。因?yàn)檠敛粌H反映RBC的聚集性,還依賴Hct。為使血沉更好地反映RBC 的聚集性,需將血沉轉(zhuǎn)化為不依賴Hct的參數(shù),以消除Hct對(duì)血沉的影響。其關(guān)系為:血沉= K[-(1-Hct+lnHct)],式中l(wèi)n為以e為底的自然對(duì)數(shù),K為常數(shù)。臨床血沉測(cè)定中應(yīng)使用血沉方程K 值進(jìn)行校正,可以更客觀地反映患者的實(shí)際情況。血沉的變化與實(shí)驗(yàn)溫度的關(guān)系同樣得到關(guān)注。魏氏法規(guī)定實(shí)驗(yàn)溫度要保證18~25℃并進(jìn)行校正。Roger提出以室溫18.3℃為基準(zhǔn),室溫高于18.3℃,可用血沉溫度校正圖進(jìn)行校正,室溫低于18.3℃時(shí),較少有報(bào)道有關(guān)解決的辦法。有作者報(bào)道,同一樣本同時(shí)分別在28℃和16℃所測(cè)得的血沉結(jié)果最高可相差6倍。所以為了避免實(shí)驗(yàn)溫度變化對(duì)血沉測(cè)定結(jié)果的影響,提高血沉測(cè)定結(jié)果的穩(wěn)定性和重復(fù)性,必須保證實(shí)驗(yàn)溫度的相對(duì)恒定和進(jìn)行必要的校正。據(jù)報(bào)道,治療藥物的選擇可影響血沉的測(cè)定,在血液流變學(xué)檢測(cè)及結(jié)果分析時(shí)要充分考慮。如:阿司匹林、右旋糖酐和頭孢噻吩可使血沉加快,促皮質(zhì)激素用于類風(fēng)濕患者時(shí)使血沉減慢作用尤其明顯。

    4.血沉測(cè)定的臨床應(yīng)用
    血沉是RBC 隨時(shí)間進(jìn)行沉降的非線性復(fù)雜過程。作為一項(xiàng)臨床常規(guī)檢測(cè)指標(biāo),特別是在動(dòng)態(tài)觀察病情變化及治療處理方面具有一定的指導(dǎo)意義,是某些疾病發(fā)生、發(fā)展、療效觀察和預(yù)后判斷的重要依據(jù)。盡管血沉對(duì)診斷的特異性和敏感性不很理想,但仍被認(rèn)為是炎性反應(yīng)急性時(shí)相反應(yīng)的可靠檢驗(yàn)指標(biāo)。隨著全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀的普遍使用,為臨床提供了更多的血沉指標(biāo)。特別是動(dòng)態(tài)血沉曲線給臨床鑒別診斷、療效觀察及其預(yù)后提供了有價(jià)值的依據(jù)。近期有學(xué)者提出血沉曲線主要分為持續(xù)速降型、持續(xù)緩降型、前期速降型、后期速降型、前期停滯型、后期停滯型和階梯型。其中健康男性77.5%為階梯型曲線,女性84.3%為持續(xù)緩降型曲線,結(jié)核病活動(dòng)期、惡性腫瘤、全身性紅斑狼瘡(SLE)、腦梗死、骨折術(shù)后、急性炎性反應(yīng)和上呼吸道感染等基本上都屬于持續(xù)速降型,100%高血壓屬于持續(xù)緩降型,100%肺癌屬于前期速降型。還有研究發(fā)現(xiàn)1 h血沉正常或接近正常的人其1 h Tm 值均> 50 min ,這表明紅細(xì)胞快速沉降期發(fā)生在血沉測(cè)定的50 min以后,提示血沉測(cè)定不能中止在60min ,應(yīng)觀測(cè)120 min血沉值才能真正反映紅細(xì)胞懸浮、聚集、快速或緩慢沉降全過程的變化規(guī)律。如SLE患者在癥狀加重前多數(shù)60 min 內(nèi)血沉曲線趨于正常, 而60~120 min 內(nèi)常發(fā)生快速沉降。所以,觀察2 h 的血沉曲線在相應(yīng)疾病病程發(fā)展、療效觀察及預(yù)后判斷中更具參考價(jià)值。

    綜上所述, 血沉的測(cè)定已從傳統(tǒng)的魏氏法向自動(dòng)測(cè)定法發(fā)展。血沉自動(dòng)測(cè)定法有快速、穩(wěn)定、可為臨床提供更多血沉參數(shù)的優(yōu)點(diǎn)。物別是血沉曲線, 對(duì)疾病病程發(fā)展、療效觀察具有重要意義, 也更完整詮釋了血沉學(xué)原理。目前, 血沉仍被認(rèn)為是具有重要臨床價(jià)值的檢測(cè)指標(biāo)。在方法學(xué)的發(fā)展時(shí)期, 認(rèn)為要重視不同方法的比對(duì), 更好地使用新方法提供的參數(shù)。同時(shí), 對(duì)血沉曲線等參數(shù)的臨床意義有待同行深入地探討和研究。

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