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生化分析儀各個(gè)參數(shù)介紹
生化分析儀各個(gè)參數(shù)介紹
加入時(shí)間:2020-05-28 11:38:31 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:2330
目前大多數(shù)生化分析儀為開放式,封閉式的儀器一般也會(huì)另外留一些檢測項(xiàng)目的空白通道由用戶自己設(shè)定分析參數(shù),因此我們有必要了解生化分析儀各個(gè)分析參數(shù)的基本含義以及設(shè)置方法。
恰當(dāng)設(shè)置各種分析參數(shù)是使用好生化分析儀極重要的部分之一,也是操作者能否正確控制儀器完成一系列復(fù)雜而有序的操作程序的關(guān)鍵,作為新世紀(jì)的檢驗(yàn)工作者,我們有必要掌握這些技術(shù)。 ![]() 常以項(xiàng)目的英文縮寫來設(shè)置,如總蛋白設(shè)置為TP,白蛋白設(shè)置為ALB等。 2.方法類型 生化分析儀常用的方法有終點(diǎn)法、連續(xù)監(jiān)測法、比濁法等,根據(jù)被檢物質(zhì)的檢測原理等選擇其中一種分析方法。 3.反應(yīng)溫度 自動(dòng)生化分析儀通過溫度控制系統(tǒng)保持溫度恒定,以保證反應(yīng)的正常進(jìn)行,其保持恒溫的方式有三種:干式恒溫器加熱、水浴式循環(huán)加熱、恒溫器循環(huán)間接加熱。 4.反應(yīng)波長 當(dāng)測定體系中只有一種組分或混合溶液中待測組分的吸收峰與其他共存物質(zhì)的吸收波長無重疊時(shí),可選用單波長,如果待測物質(zhì)有幾個(gè)吸收峰,可選用吸光度較大的一個(gè)波長,或者選擇在吸收峰處吸光度隨波長變化較小的某個(gè)波長。 5.反應(yīng)方向 有正向反應(yīng)和負(fù)向反應(yīng)兩種,反應(yīng)過程中吸光度增加為正向反應(yīng),吸光度下降為負(fù)向反應(yīng)。 6.樣品量與試劑量 樣品與試劑量的確定一般按照試劑說明書上的比例,并結(jié)合儀器的特性進(jìn)行設(shè)置,亦可根據(jù)手工法按比例縮減或重新設(shè)計(jì),但要考慮到檢測靈敏度、線性范圍,盡可能將樣品稀釋倍數(shù)大些,以降低樣品中其他成分的影響。 7.分析時(shí)間 分析時(shí)間包括孵育時(shí)間、延遲時(shí)間、監(jiān)測時(shí)間等,選擇不同的分析方法應(yīng)選擇相應(yīng)的分析時(shí)間。 8.計(jì)算因子(F值)和實(shí)測F值 用連續(xù)監(jiān)測法進(jìn)行酶活性測定時(shí),不需作標(biāo)準(zhǔn)管或標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)摩爾吸光系數(shù)很容易進(jìn)行酶活性濃度的計(jì)算。 9.線性度 是非線性比率的界線,常用%表示,其計(jì)算公式為,式中:k1為連續(xù)監(jiān)測時(shí)間2/3內(nèi)前讀數(shù)時(shí)間的斜率,k2為后2/3讀數(shù)時(shí)間的斜率,k3為總的斜率,一般設(shè)置為15%。 10.底物耗盡限額 選擇連續(xù)監(jiān)測法或兩點(diǎn)終點(diǎn)法時(shí)設(shè)置,不同型號分析儀的設(shè)計(jì)不一樣,有的為零點(diǎn)與監(jiān)測首點(diǎn)吸光度的差額,有的為吸光度上升或下降至指定吸光度(MAX-OD/MIN-OD)的數(shù)值。 11.試劑吸光度上限、下限 試劑吸光度上限為正向反應(yīng)用,可參考試劑盒說明書數(shù)值折算成所用比色杯的光徑。 12.線性范圍 試劑盒的線性范圍與試劑質(zhì)量、反應(yīng)時(shí)試劑/樣品比有關(guān),應(yīng)實(shí)檢測劑盒的線性范圍。 13.校正方法 儀器內(nèi)的設(shè)置的校正方法一般包含二點(diǎn)校正、多點(diǎn)校正、非線性校正等。二點(diǎn)校正是指用一個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品和一個(gè)試劑空白進(jìn)行校正的方法,該法要求反應(yīng)必須符合朗伯-比爾定律,即標(biāo)準(zhǔn)曲線呈直線。 14.線性回歸方程 用于校準(zhǔn)不同分析方法間測定結(jié)果的一致性,在定標(biāo)后即可求得,有斜率和截距兩個(gè)參數(shù),a為曲線在縱軸上的截距,b為曲線的斜率。 |